紫外分光光度法测定水中总酚的含量
一、实验目的
1．掌握紫外分光光度法测定酚的原理和方法。
2．掌握应用紫外分光光度计进行定量分析的方法和基本操作。
二、实验原理
苯酚是工业废水中的一种有害物质，如果流入江河，会使水质受到污染，因此在检测饮用水的卫生质量时，需对水中酚含量进行测定。
苯具有环状共轭体系，由 π→π*跃迁在紫外吸收光区产生三个特征吸收带：强度较高的E1带，出现在180nm左右；中等强度的E2带，出现在204nm左右；强度较弱的B带，出现在255nm。有机溶剂、苯环上的取代基及其取代位置都可能对最大吸收峰的波长、强度和形状产生影响。具有苯环结构的化合物在紫外光区均有较强的特征吸收峰，在苯环上的部分取代基（助色团）使吸收增强，而苯酚在270nm处有特征吸收峰，在一定范围内其吸收强度与苯酚的含量成正比，符合Lambert-Beer定律，因此，可用紫外分光光度法直接测定水中总酚的含量。
三、仪器与试剂
紫外可见分光光度计，石英比色皿（1cm）2 个，50mL容量瓶，移液管等。
苯酚标准溶液250 mg·L -1：准确称取0.0250g苯酚于250mL烧杯，加20mL去离子水溶解，移入100mL容量瓶，用去离子水定容至刻度，摇匀。
四、实验步骤
1．标准系列溶液的配制
取5只50mL容量瓶，分别加入2.00，4.00，6.00，8.00，10.00mL浓度为250 mg·L -1的苯酚标准溶液，用去离子水稀释至刻度，摇匀。计算其浓度（mg·L -1）。
2．吸收曲线的测定
取上述标准系列中的任一溶液，用1cm石英比色皿，以溶剂空白（去离子水）作参比，在220～350nm波长范围内，扫描绘制吸收曲线。
3．标准曲线的测定
选择苯酚的最大吸收波长（λmax），用1cm石英比色皿，以溶剂空白（去离子水）作参比，按浓度由低到高顺序依次测定苯酚标准溶液的吸光度。
4．水样的测定
在与上述测定标准曲线相同的条件下，测定水样的吸光度。
五、数据记录与处理
1．以吸光度为纵坐标，波长为横坐标绘制吸收曲线，找出最大吸收波长λmax，并计算其εmax。
2．以吸光度为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。然后，根据水样吸光度在标准曲线上查出相对应的浓度值，计算出水样中苯酚的含量（g·L-1 ）。
六、思考题
1．紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同？
2．紫外分光光度计与可见分光光度计的仪器部件有什么不同？
3．在用分光光度计进行定量分析时，哪些操作可能影响测定结果的准确性？ |
当前位置：